SIRT1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400085-LAC

SIRT1 kodiert Sirtuin 1, eine NAD⁺-abhängige Protein-Deacetylase, die zelluläre Antworten auf den Nährstoffstatus, oxidativen Stress und DNA-Schäden koordiniert. Durch die Deacetylierung von Substraten wie p53, FOXO-Transkriptionsfaktoren, NF-κB und PGC-1α moduliert SIRT1 die Chromatinzugänglichkeit, die mitochondriale Biogenese, Autophagie und entzündliche Signalübertragung in Signalwegen, die mit der metabolischen Homöostase verknüpft sind. Die SIRT1-Aktivität greift in die AMPK–mTOR-Signalgebung und die zirkadiane Regulation ein und formt dadurch transkriptionelle Programme, die das Zellüberleben und die Differenzierung beeinflussen. Eine dysregulierte SIRT1-Expression oder -Aktivität wurde mit der Biologie des Alterns sowie mit Mechanismen in Verbindung gebracht, die für Krebs, Neurodegeneration und Stoffwechselstörungen relevant sind, was seine häufige Nutzung als Knotenpunkt für Signalweg-Studien auf Systemebene unterstützt.

SIRT1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente SIRT1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

SIRT1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der SIRT1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen SIRT1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen SIRT1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.