SIRP-α CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401201

개요

시그널 조절 단백질 알파(SIRP-α)는 인간 SIRPA 유전자에 의해 암호화되는 면역글로불린 슈퍼패밀리의 막관통 수용체로, 선천면역 활성화를 조절하는 역할을 하며 특히 골수계 세포에서 두드러지게 발현됩니다. SIRP-α는 세포질 내 ITIM 모티프의 인산화와 SHP-1/SHP-2 인산가수분해효소(포스파테이스)의 모집을 통해, CD47 결합 하위에서 억제성 신호를 전달하여 세포골격 역학, 식세포작용, 부착, 그리고 사이토카인 반응을 조절합니다. 이러한 CD47–SIRP-α 축은 염증성 미세환경에서 대식세포와 수지상세포의 행동을 형성하며, 종양의 면역 회피, 만성 염증, 그리고 골수계 기능 이상과도 연관된 것으로 보고되어 왔습니다. 따라서 SIRPA는 면역 항상성, 항원제시세포 기능, 그리고 세포–세포 인식(상호 인지)을 조절하는 경로에서 폭넓게 연구되고 있습니다.

SIRP-α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SIRPA 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SIRPA 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SIRPA의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SIRP-α 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SIRP-α 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SIRPA 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SIRP-α 기능에 중요한 SIRPA 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SIRPA 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SIRP-α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 SIRP-α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SIRPA 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SIRP-α HDR 플라스미드 (h) 및 SIRP-α HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SIRPA 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SIRPA 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.