Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
SH2D1A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422910
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SH2D1A El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SH2D1A, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SH2D1A Anticuerpo (A-8): sc-398118
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SH2D1A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422910 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Sh2d1a codifica SH2D1A (SAP), un adaptador con dominio SH2 expresado predominantemente en células T y células NK que acopla los receptores de la familia SLAM a la señalización downstream. Al coordinar complejos proximales al receptor y modular quinasas y fosfatasas, SH2D1A influye en la formación de la sinapsis inmunológica, las funciones efectoras citotóxicas y la ayuda de las células T durante las respuestas inmunes antivirales y humorales. La alteración de la señalización dependiente de SH2D1A perturba la activación de los linfocitos y la homeostasis inmunitaria, lo que la hace relevante para estudios de desregulación inmune, susceptibilidad a infecciones virales y fenotipos linfoproliferativos. Los modelos murinos de Sh2d1a se utilizan ampliamente para investigar las contribuciones del eje SLAM–SAP a la biología del centro germinal y al control mediado por células NK/T de células infectadas o transformadas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SH2D1A (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Sh2d1a en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Sh2d1a junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Sh2d1a tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SH2D1A.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Sh2d1a para la investigación de la señalización de SH2D1A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Sh2d1a críticos para la función de SH2D1A
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Sh2d1a para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SH2D1A CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SH2D1A CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Sh2d1a. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SH2D1A (m) y el plásmido HDR SH2D1A (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Sh2d1a para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Sh2d1a definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.