SFXN2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-414132

Übersicht

SFXN2 (Sideroflexin 2) ist ein Carrier der inneren Mitochondrienmembran, der an der Aufrechterhaltung der mitochondrialen metabolischen Homöostase beteiligt ist und oxidative‑Phosphorylierungs‑gekoppelte Prozesse unterstützt. Als Mitglied der Sideroflexin‑Familie wird es mit Transportfunktionen in Verbindung gebracht, die den Ein‑Kohlenstoff‑Stoffwechsel, die Nutzung von Aminosäuren und das Redoxgleichgewicht beeinflussen und dadurch die mitochondriale Atmung sowie den Umgang mit reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) mitbestimmen. Veränderungen des mitochondrialen Transports und des bioenergetischen Zustands können Stresssignalwege, angeborene Immunwege und Entscheidungen über das Zellschicksal modulieren. Entsprechend ist SFXN2 für Forschungsfelder von Interesse, die mitochondriale Dysfunktion mit kardiometabolischen und neurodegenerationsbezogenen Phänotypen sowie mit der metabolischen Umprogrammierung von Krebszellen verknüpfen.

Das SFXN2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SFXN2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SFXN2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SFXN2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SFXN2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SFXN2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SFXN2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SFXN2-Exone abzielen, die für die SFXN2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SFXN2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SFXN2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SFXN2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SFXN2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SFXN2 HDR-Plasmid (h) und SFXN2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SFXN2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SFXN2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.