Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SerpinB1 Double Nickase Plasmid (h): sc-402083-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das SerpinB1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- SerpinB1 Double-Nickase-Plasmid (h) und SerpinB1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf SERPINB1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: SerpinB1: sc-293462
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
SerpinB1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402083-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SerpinB1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402083-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SERPINB1 kodiert SerpinB1, einen intrazellulären Serinprotease-Inhibitor, der neutrophilenabgeleitete Proteasen wie Elastase und Cathepsin G hemmt und dadurch proteolytischen Stress begrenzt sowie die Gewebehomöostase unterstützt. SerpinB1 trägt zur Regulation inflammatorischer Signalwege, zum Überleben von Leukozyten und zur Integrität der epithelialen Barriere bei, indem es proteasegetriebene Signalwege moduliert, die mit oxidativem Stress und Zelltod verknüpft sind. Eine veränderte SERPINB1-Expression oder -Funktion wurde mit fehlregulierten angeborenen Immunantworten und einem Ungleichgewicht von Proteasen in entzündlichen Kontexten der Atemwege und der Haut in Verbindung gebracht; zudem wird es in Studien zu myeloiden Zellzuständen als Marker verwendet. Diese Eigenschaften machen SERPINB1 zu einem nützlichen Ziel, um Protease-Inhibitor-Netzwerke, die Biologie von Neutrophilen und entzündungsassoziierte Remodeling-Mechanismen in humanen Zellmodellen zu untersuchen.
SerpinB1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des SERPINB1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von SERPINB1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die SERPINB1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit SERPINB1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.