Plasmide Double Nickase (h) SerpinA9: sc-415475-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SerpinA9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SerpinA9 Double Nickase (h) et le plasmide SerpinA9 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SERPINA9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SerpinA9 Antibody (913G2V): sc-517654
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SerpinA9 | sc-415475-NIC | 20 µg | $410.00 |
SERPINA9 code pour SerpinA9, un membre de la superfamille des inhibiteurs de protéases à sérine (serpines) qui contribue à façonner la protéolyse extracellulaire en modulant l’activité des protéases dans les microenvironnements tissulaires. Le contrôle, par les serpines, des cascades de protéases participe à des processus tels que le remodelage de la matrice extracellulaire, la migration cellulaire et la dynamique des cellules immunitaires, reliant ainsi SERPINA9 à des voies qui influencent la signalisation inflammatoire et la régulation, dépendante des protéases, de la communication cellulaire. Des profils d’expression altérés de SERPINA9 ont été rapportés dans des contextes lymphoïdes, ce qui étaye son intérêt pour les études de la biologie des lymphocytes B, des interactions avec le microenvironnement tumoral et des dysrégulations associées à l’immunité. En tant que gène humain codant une protéine et présentant une expression associée aux tissus et aux lignées cellulaires, SERPINA9 est fréquemment étudié dans des analyses transcriptomiques et de génomique fonctionnelle afin de préciser son rôle dans l’équilibre des protéases et l’homéostasie immunitaire.
SerpinA9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SERPINA9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SERPINA9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SERPINA9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SERPINA9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.