Plasmide Double Nickase (h) Septin 1: sc-405151-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Septin 1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Septin 1 Double Nickase (h) et le plasmide Septin 1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SEPT1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Septin 1 Antibody (H-10): sc-373925
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Septin 1 | sc-405151-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Septin 1 | sc-405151-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **SEPT1** code la septine 1, une protéine cytosquelettique liant le GTP qui s’assemble en filaments de septines hétéro-oligomériques et en échafaudages en forme d’anneau. La septine 1 contribue à la cytokinèse, à la polarité cellulaire, au trafic vésiculaire et à l’organisation des réseaux d’actine et de microtubules, assurant un contrôle spatial de la dynamique membranaire et de la compartimentation. Le remodelage du cytosquelette associé à **SEPT1** est pertinent pour des processus tels que la migration cellulaire et la progression mitotique, et des altérations de l’expression ou de l’assemblage des septines ont été rapportées dans des contextes incluant la transformation oncogénique ainsi que des phénotypes neurodéveloppementaux ou neurodégénératifs. Dans le cadre plus large de la voie des septines, **SEPT1** fonctionne en coordination avec d’autres septines pour réguler la formation du corps intermédiaire (midbody) et les réponses au stress cellulaire.
Septin 1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SEPT1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SEPT1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SEPT1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SEPT1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.