SEMA3G CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406077

Übersicht

SEMA3G kodiert Semaphorin-3G, ein sezerniertes Leitsignal, das über Neuropilin-/Plexin-Rezeptorkomplexe signalisiert und dadurch Zytoskelett-Umbau, Zellmigration und Gewebemusterbildung reguliert. Neben Funktionen in der Axonführung und Neuroentwicklung beeinflusst SEMA3G angiogenes und lymphatisches Sprossen und kann über semaphorinabhängige Signalwege das Verhalten von Endothel- und Immunzellen modulieren. Diese Prozesse überschneiden sich mit Signalwegen, die Adhäsion, Motilität und vaskuläres Remodeling steuern, wodurch SEMA3G ein relevanter Knotenpunkt für Untersuchungen in der Entwicklungsbiologie und der durch das Mikroumfeld vermittelten Regulation von Zellbewegung ist. Veränderte Semaphorin-Signalgebung wurde mit Krebsprogression und metastaseassoziierten Phänotypen sowie mit vaskulären und entzündlichen Funktionsstörungen in Verbindung gebracht, was die Untersuchung von SEMA3G in krankheitsrelevanten Modellen unterstützt.

Das SEMA3G CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SEMA3G-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SEMA3G-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SEMA3G nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SEMA3G-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SEMA3G-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SEMA3G-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SEMA3G-Exone abzielen, die für die SEMA3G-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SEMA3G-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SEMA3G CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SEMA3G CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SEMA3G-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SEMA3G HDR-Plasmid (h) und SEMA3G HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SEMA3G-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SEMA3G-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.