Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Sec61β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425892
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sec61β O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Sec61β, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Sec61β Anticorpo (E-6): sc-393633
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sec61β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-425892 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SEC61B codifica a subunidade beta do translocão Sec61, um componente central do canal de membrana do retículo endoplasmático (RE) que medeia a importação cotraducional de proteínas e a integração de polipeptídeos nascentes na via secretora. Em células de camundongo, a Sec61β dá suporte à biogênese de proteínas no RE, coordena-se com o ancoramento de ribossomos e contribui para processos de proteostase do RE ligados ao dobramento e à degradação associada ao RE (ERAD). Alterações na função do translocão podem perturbar a secreção, a homeostase de proteínas de membrana e a sinalização da resposta a proteínas mal dobradas (unfolded protein response, UPR), conectando a atividade do complexo SEC61 à adaptação celular ao estresse. Como a integridade da via secretora sustenta a sinalização imune, o metabolismo e a função neuronal, Sec61b é frequentemente estudado no contexto de desequilíbrio de proteostase e de mecanismos de doença relacionados ao estresse.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Sec61β (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sec61b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sec61b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sec61b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Sec61β.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sec61b para a investigação da sinalização de Sec61β, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sec61b críticos para a função Sec61β
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sec61b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Sec61β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Sec61β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sec61b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Sec61β Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Sec61β (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sec61b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sec61b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.