Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) SCCA1/2: sc-418018-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SCCA1/2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SCCA1/2 (h) y el plásmido de doble nickasa SCCA1/2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SERPINB4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SCCA1/2 Anticuerpo (B-9): sc-28384
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SCCA1/2 | sc-418018-NIC | 20 µg | $410.00 |
SERPINB4 codifica el antígeno de carcinoma de células escamosas 1/2 (SCCA1/2), un inhibidor de proteasas de serina del clado B que modula la proteólisis pericelular e intracelular al dirigirse a enzimas como las catepsinas y proteasas relacionadas. Al restringir la actividad de las proteasas, SCCA1/2 influye en la homeostasis de la barrera epitelial, las respuestas inflamatorias y procesos asociados al estrés, incluidos la apoptosis, la función lisosomal y la remodelación del entorno extracelular. La expresión de SERPINB4 está enriquecida en epitelios estratificados y puede alterarse en contextos de inflamación crónica y displasia epitelial, lo que lo convierte en un nodo molecular útil para estudiar el equilibrio proteasa–antiproteasa. La desregulación de SCCA1/2 se ha asociado con cambios en los microambientes adyacentes al tumor y en redes de señalización inmunitaria, lo que respalda su relevancia en estudios mecanísticos de la patobiología epitelial.
SCCA1/2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SERPINB4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SERPINB4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SERPINB4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SERPINB4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.