SCARA5 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407005

Panoramica

SCARA5 (scavenger receptor class A, membro 5) è un recettore di riconoscimento di pattern presente sulla superficie cellulare, implicato nel legame e nell’internalizzazione di ligandi specifici, tra cui la ferritina, collegandolo alla gestione del ferro e all’endocitosi mediata da recettore. Nelle cellule umane, SCARA5 contribuisce alla regolazione dell’adesione e della migrazione cellulari e può influenzare gli output della segnalazione infiammatoria attraverso processi associati ai recettori scavenger. Un’espressione alterata di SCARA5 è stata riportata in molteplici contesti tumorali e in microambienti fibrotici o infiammatori, dove può correlare con cambiamenti nei programmi epitelio-mesenchimali e nel rimodellamento della matrice extracellulare. Queste caratteristiche rendono SCARA5 un bersaglio utile per studi meccanicistici della segnalazione associata al ferro, del traffico di membrana e della regolazione, da parte del microambiente, del comportamento cellulare.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SCARA5 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SCARA5 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SCARA5 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SCARA5 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SCARA5.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SCARA5 per lo studio della segnalazione di SCARA5, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni SCARA5 critici per la funzione di SCARA5
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SCARA5 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal SCARA5 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal SCARA5 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SCARA5. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal SCARA5 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR SCARA5 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SCARA5 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SCARA5 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.