SCARA5 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407005

Übersicht

SCARA5 (Scavenger-Rezeptor Klasse A, Mitglied 5) ist ein Pattern-Recognition-Rezeptor auf der Zelloberfläche, der an die Bindung und Internalisierung spezifischer Liganden, einschließlich Ferritin, beteiligt ist und damit mit der Eisenhomöostase sowie der rezeptorvermittelten Endozytose verknüpft ist. In menschlichen Zellen trägt SCARA5 zur Regulation der Zelladhäsion und -migration bei und kann über scavengerrezeptor-assoziierte Prozesse die Ausgänge inflammatorischer Signalwege beeinflussen. Eine veränderte SCARA5-Expression wurde in verschiedenen Tumorkontexten sowie in fibrotischen oder entzündlichen Mikroumgebungen beschrieben, wo sie mit Veränderungen epithelial-mesenchymaler Programme und dem Umbau der extrazellulären Matrix korrelieren kann. Diese Eigenschaften machen SCARA5 zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien zu eisenassoziierter Signalübertragung, Membrantransport und der mikroumgebungsbedingten Regulation des Zellverhaltens.

Das SCARA5 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SCARA5-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SCARA5-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SCARA5 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SCARA5-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SCARA5-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SCARA5-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SCARA5-Exone abzielen, die für die SCARA5-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SCARA5-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SCARA5 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SCARA5 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SCARA5-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SCARA5 HDR-Plasmid (h) und SCARA5 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SCARA5-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SCARA5-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.