Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plásmido Doble Nickase (h) SAP 18: sc-404214-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SAP 18 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SAP 18 (h) y el plásmido de doble nickasa SAP 18 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SAP18. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SAP 18 Anticuerpo (C-3): sc-365377
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SAP 18 | sc-404214-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SAP 18 | sc-404214-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **SAP18** codifica SAP 18, un componente central de la maquinaria de represión transcripcional **Sin3A/HDAC** que ayuda a acoplar factores de unión al ADN específicos de secuencia con la desacetilación de histonas y la compactación de la cromatina. A través de su participación en el silenciamiento génico dependiente de HDAC, SAP 18 influye en programas transcripcionales que gobiernan el control del ciclo celular, la diferenciación y las respuestas al estrés celular. Los complejos asociados a SAP18 también se conectan con el procesamiento de ARN y vías de señalización apoptótica, lo que refleja funciones amplias en el mantenimiento de la homeostasis nuclear. La regulación alterada de componentes de Sin3/HDAC, incluido SAP18, se ha relacionado con estados epigenéticos desregulados observados en el cáncer y otros trastornos caracterizados por un control transcripcional aberrante.
SAP 18 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SAP18 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SAP18. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SAP18. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SAP18 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.