Plásmido Doble Nickase (h) RPGRIP1: sc-412755-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)RPGRIP1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RPGRIP1 (h) y el plásmido de doble nickasa RPGRIP1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RPGRIP1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) RPGRIP1 | sc-412755-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) RPGRIP1 | sc-412755-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RPGRIP1 (proteína 1 que interactúa con el regulador de la GTPasa RPGR, asociada a retinitis pigmentosa) codifica una proteína de la zona de transición ciliar que actúa como andamiaje para RPGR y otros componentes necesarios para la integridad del cilio conector de los fotorreceptores y el tráfico de proteínas hacia el segmento externo. Contribuye a la organización del centrosoma/cuerpo basal y favorece el ensamblaje y el mantenimiento del cilio primario, vinculando la dinámica del citoesqueleto con la función de compuerta del cilio. Los procesos dependientes de RPGRIP1 se solapan con las vías de señalización mediadas por cilios al regular la compartimentalización de receptores y de la maquinaria de transporte. La alteración genética de RPGRIP1 se asocia con degeneraciones retinianas hereditarias, incluidas la amaurosis congénita de Leber y la retinitis pigmentosa, lo que la convierte en una diana clave para modelar la disfunción ciliar en células humanas.
RPGRIP1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RPGRIP1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RPGRIP1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RPGRIP1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RPGRIP1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.