Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO RPA40 (h): sc-404594
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- RPA40 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique RPA40, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: RPA40 Antibody (H-6): sc-374443
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO RPA40 (h) | sc-404594 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
POLR1C code RPA40, une sous-unité commune des ARN polymérases I et III qui favorise l’assemblage et la stabilité de ces complexes de transcription. Par ses rôles dans la synthèse des ARNr par la Pol I et la transcription des ARNt et d’autres petits ARN non codants par la Pol III, RPA40 contribue à la biogenèse des ribosomes, à la protéostasie et au contrôle de la croissance cellulaire. Une perturbation de la production transcriptionnelle liée à POLR1C peut altérer la fonction nucléolaire et les réponses cellulaires au stress, reliant ce facteur à des voies qui influencent la prolifération et la différenciation. Des variants de POLR1C ont été associés à des maladies héréditaires touchant la myéline et le développement cranio-facial, soulignant l’importance de l’intégrité des Pol I/III en biologie humaine.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO RPA40 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène POLR1C dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du POLR1C, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert POLR1C à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine RPA40.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en POLR1C pour l'étude de la signalisation de RPA40, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de POLR1C essentiels à la fonction de RPA40
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de POLR1C pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le RPA40 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le RPA40 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus POLR1C. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le RPA40 plasmide HDR (h) et le RPA40 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie POLR1C pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles POLR1C définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.