Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Rho G Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402608
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Rho G El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Rho G, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Rho G Anticuerpo (1F3 B3 E5): sc-80015
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Rho G Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402608 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
RHOG codifica Rho G, un miembro de la familia Rho de pequeñas GTPasas que funciona como un interruptor molecular que conecta la señalización de receptores con la remodelación del citoesqueleto de actina. Rho G regula la formación de ondulaciones de membrana, el extendido celular y la migración al coordinar vías que convergen en la actividad de Rac1 y Cdc42, y al favorecer la dinámica de adhesión dependiente de integrinas. A través de estos procesos, RHOG influye en el tráfico endocítico y en funciones de las células inmunitarias como la fagocitosis y las respuestas inducidas por antígenos. La señalización desregulada de Rho G se ha investigado en contextos en los que un control citoesquelético alterado contribuye a una motilidad celular aberrante y a fenotipos inflamatorios, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de la invasión de células cancerosas y del comportamiento de las células inmunitarias.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Rho G (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RHOG en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RHOG junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RHOG tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Rho G.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RHOG para la investigación de la señalización de Rho G, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de RHOG críticos para la función de Rho G
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RHOG para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Rho G CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Rho G CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RHOG. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Rho G (h) y el plásmido HDR Rho G (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RHOG para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RHOG definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.