Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RGS7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423946
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- RGS7 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im RGS7-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
RGS7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-423946 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Rgs7 kodiert den „Regulator of G protein signaling 7“ (RGS7), ein GAP, das die Gαi/o‑vermittelte GTP‑Hydrolyse beschleunigt und damit GPCR‑Signalwege beendet. RGS7 wirkt besonders ausgeprägt im Nervensystem über Komplexe mit Gβ5 und R7BP und prägt die rezeptorvermittelte Modulation der Adenylylcyclase-/cAMP‑Signalübertragung, die Aktivität von Ionenkanälen und die synaptische Transmission. Indem RGS7 Amplitude und Dauer von Neurotransmitterantworten begrenzt, beeinflusst es neuronale Erregbarkeit, Plastizität und die Signaloutputs auf Ebene neuronaler Schaltkreise. Eine Fehlregulation RGS7‑assoziierter Signalwege wurde in genetischen und funktionellen Studien mit neuroverhaltensbezogenen und neuropsychiatrischen Phänotypen in Verbindung gebracht, was seine Relevanz für mechanistische neurowissenschaftliche Forschung unterstreicht.
Das RGS7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Rgs7-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Rgs7-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Rgs7 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die RGS7-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Rgs7-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der RGS7-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Rgs7-Exone abzielen, die für die RGS7-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Rgs7-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom RGS7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom RGS7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Rgs7-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das RGS7 HDR-Plasmid (m) und RGS7 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Rgs7-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Rgs7-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.