RENBP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422648

Descripción general

Renbp codifica la proteína de unión a la renina (RENBP), una proteína asociada a membrana implicada en la regulación de componentes del sistema renina–angiotensina y de vías relacionadas de procesamiento proteolítico. En tejidos de ratón, la expresión de RENBP se ha vinculado con la modulación de la disponibilidad de renina y de la señalización posterior que influye en el tono vascular, la homeostasis de electrolitos y las respuestas inflamatorias. A través de estas conexiones, Renbp es relevante para estudios mecanísticos de la regulación de la presión arterial y de las vías de estrés cardiometabólico. La señalización alterada del sistema renina–angiotensina también se asocia con patología renal y cardiovascular, lo que convierte a Renbp en un nodo útil para analizar redes génicas que acoplan la regulación de proteasas con la fisiología sistémica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RENBP (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Renbp en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Renbp junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Renbp tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RENBP.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Renbp para la investigación de la señalización de RENBP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Renbp críticos para la función de RENBP
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Renbp para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RENBP CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido RENBP CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Renbp. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RENBP (m) y el plásmido HDR RENBP (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Renbp para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Renbp definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.