RBMY1J Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405629

Descripción general

RBMY1J codifica una proteína de unión a ARN ligada al cromosoma Y, relacionada con la familia RBMY, caracterizada por un motivo de reconocimiento de ARN y por funciones en la regulación posranscripcional. Las proteínas RBMY se expresan predominantemente en la línea germinal masculina y se han implicado en la espermatogénesis mediante el control del empalme (splicing) del pre-ARNm, la estabilidad del ARNm y, potencialmente, la regulación de la traducción en células germinales en desarrollo. Esta actividad se solapa con vías de procesamiento de ARN asociadas al espliceosoma y con programas más amplios de expresión génica necesarios para la progresión meiótica y la diferenciación de las células germinales. Las alteraciones en la integridad del locus RBMY o en su expresión se han asociado con anomalías del cromosoma Y y fenotipos de infertilidad masculina, lo que hace que RBMY1J sea relevante para estudios de regulación génica en la línea germinal y biología reproductiva.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RBMY1J (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RBMY1J en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RBMY1J junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RBMY1J tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RBMY1J.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RBMY1J para la investigación de la señalización de RBMY1J, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RBMY1J críticos para la función de RBMY1J
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RBMY1J para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RBMY1J CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RBMY1J CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RBMY1J. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RBMY1J (h) y el plásmido HDR RBMY1J (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RBMY1J para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RBMY1J definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.