Plasmide Double Nickase (h) RAET1G: sc-410520-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RAET1G correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RAET1G Double Nickase (h) et le plasmide RAET1G Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RAET1G. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RAET1G | sc-410520-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) RAET1G | sc-410520-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAET1G code un ligand de surface de NKG2D appartenant à la famille RAET1/ULBP, induit par le stress cellulaire, qui se lie à NKG2D sur les cellules NK et certains sous-ensembles de lymphocytes T afin de favoriser la reconnaissance immunitaire. Son expression relie les réponses aux dommages de l’ADN, la signalisation inflammatoire et les processus de trafic membranaire au seuil d’activation des lymphocytes cytotoxiques. Une dérégulation de RAET1G a été associée à une surveillance immunitaire altérée dans le cancer ainsi qu’à des microenvironnements inflammatoires, où l’induction de ligands de stress peut moduler l’immunité tissulaire. En conséquence, RAET1G est largement étudié dans les voies qui contrôlent l’immunogénicité induite par le stress, les interactions tumeur–système immunitaire et la régulation des réponses des lymphocytes de type inné.
RAET1G Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RAET1G dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RAET1G. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RAET1G. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RAET1G.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.