Plasmide CRISPR/Cas9 KO Rab11-FIP3 (h): sc-405735
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Rab11-FIP3 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Rab11-FIP3, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Rab11-FIP3 Antibody (6H6): sc-517043
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Rab11-FIP3 (h) | sc-405735 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
RAB11FIP3 code la protéine 3 interagissant avec la famille Rab11 (Rab11-FIP3), un effecteur de Rab11 qui coordonne la fonction des endosomes de recyclage et le trafic membranaire au cours de la cytokinèse. Rab11-FIP3 aide à orienter le recyclage endocytaire et le ciblage des vésicules vers le corps intermédiaire (midbody), soutenant l’abscission et une progression correcte du cycle cellulaire, et elle s’interface avec des voies de transport dépendantes de RAB11 qui façonnent le recyclage des récepteurs et la polarité. Par son rôle dans la dynamique des endosomes de recyclage, Rab11-FIP3 contribue à des processus influençant la migration et la prolifération cellulaires, ce qui la rend pertinente pour l’étude des dérégulations du trafic associées à des phénotypes liés au cancer. Une expression altérée ou une perturbation fonctionnelle de Rab11-FIP3 a également été associée à des défauts de division cellulaire et des voies de remodelage membranaire pouvant affecter la stabilité génomique.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Rab11-FIP3 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène RAB11FIP3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du RAB11FIP3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert RAB11FIP3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Rab11-FIP3.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en RAB11FIP3 pour l'étude de la signalisation de Rab11-FIP3, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de RAB11FIP3 essentiels à la fonction de Rab11-FIP3
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de RAB11FIP3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Rab11-FIP3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Rab11-FIP3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus RAB11FIP3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Rab11-FIP3 plasmide HDR (h) et le Rab11-FIP3 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie RAB11FIP3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles RAB11FIP3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.