Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rab 34 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406606
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Rab 34 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Rab 34, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Rab 34 Anticuerpo (C-5): sc-376710
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Rab 34 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406606 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
RAB34 codifica Rab 34, una pequeña GTPasa de la familia Rab que regula el tráfico intracelular de membranas, con funciones descritas en la dinámica del aparato de Golgi y de los endosomas, el posicionamiento de los lisosomas y la maduración de los fagosomas. Mediante su ciclo entre los estados unidos a GTP y a GDP, Rab 34 ayuda a coordinar el transporte vesicular, el anclaje de orgánulos y la clasificación de carga, lo que influye en el recambio de receptores y en las salidas de señalización. La desregulación del tráfico mediado por Rab puede alterar la función del eje autofagia–lisosoma y la homeostasis de membranas, procesos que se estudian con frecuencia en investigaciones sobre el comportamiento de las células cancerosas, la neurodegeneración y las interacciones huésped–patógeno. Por ello, RAB34 es un nodo útil para diseccionar las vías de transporte vesicular y su impacto en la fisiología celular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Rab 34 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RAB34 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RAB34 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RAB34 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Rab 34.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RAB34 para la investigación de la señalización de Rab 34, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de RAB34 críticos para la función de Rab 34
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RAB34 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Rab 34 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Rab 34 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RAB34. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Rab 34 (h) y el plásmido HDR Rab 34 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RAB34 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RAB34 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.