Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PTPMT1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403905
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- PTPMT1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico PTPMT1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PTPMT1 Anticuerpo (B-3): sc-390901
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
PTPMT1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403905 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
PTPMT1 codifica una fosfatasa de tirosina proteica localizada en la mitocondria que desfosforila el fosfatidilglicerofosfato para apoyar la biosíntesis de cardiolipina y la integridad de la membrana mitocondrial interna. Al regular la organización, dependiente de la cardiolipina, de los supercomplejos de la cadena respiratoria, PTPMT1 influye en la fosforilación oxidativa, la dinámica mitocondrial y la homeostasis energética celular. Su actividad se relaciona con la remodelación lipídica y con vías de respuesta al estrés mitocondrial que determinan la proliferación y la supervivencia en células con altas demandas metabólicas. La desregulación del metabolismo lipídico mitocondrial vinculado a PTPMT1 se ha asociado con cambios en la bioenergética y en el equilibrio redox, lo que la hace relevante para estudios de adaptación metabólica y disfunción mitocondrial.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO PTPMT1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PTPMT1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PTPMT1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PTPMT1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PTPMT1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PTPMT1 para la investigación de la señalización de PTPMT1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de PTPMT1 críticos para la función de PTPMT1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PTPMT1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido PTPMT1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PTPMT1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PTPMT1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PTPMT1 (h) y el plásmido HDR PTPMT1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PTPMT1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PTPMT1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.