PTP1B Double Nickase Plasmid (m): sc-422502-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das PTP1B Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- PTP1B Double-Nickase-Plasmid (m) und PTP1B Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Ptpn1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
PTP1B Double Nickase Plasmid (m) | sc-422502-NIC | 20 µg | $410.00 |
Das Mausgen *Ptpn1* kodiert die Protein-Tyrosinphosphatase 1B (PTP1B), eine ER-assoziierte Phosphatase, die Rezeptor-Tyrosinkinasen und zentrale Signalintermediäre dephosphoryliert, um Wachstumsfaktor- und Zytokinantworten zu begrenzen. PTP1B ist ein zentraler negativer Regulator der Signalübertragung über Insulin- und Leptinrezeptoren und prägt die Dynamik der PI3K–AKT- und MAPK-Signalwege sowie die nachgeschaltete Expression metabolischer Gene. Durch die Modulation von JAK/STAT und der Phosphorylierungszustände von Rezeptoren beeinflusst PTP1B entzündliche Signalgebung, Zelladhäsion und Stressantworten. Eine fehlregulierte *Ptpn1*/PTP1B-Aktivität wird breit im Kontext von Insulinresistenz, adipositasassoziierter metabolischer Dysfunktion und krebsrelevanter Umprogrammierung von Signalwegen untersucht, was ihren Einsatz für die Analyse von Signalwegen sowie Genotyp-Phänotyp-Studien in Mausmodellen unterstützt.
PTP1B Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Ptpn1-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Ptpn1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Ptpn1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Ptpn1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.