Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PTP1B Double Nickase Plasmid (h): sc-400732-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das PTP1B Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- PTP1B Double-Nickase-Plasmid (h) und PTP1B Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf PTPN1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: PTP1B: sc-133259
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
PTP1B Double Nickase Plasmid (h) | sc-400732-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PTP1B Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400732-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTPN1 kodiert die Protein-Tyrosinphosphatase 1B (PTP1B), eine mit dem endoplasmatischen Retikulum assoziierte Phosphatase, die aktivierte Rezeptor-Tyrosinkinasen und zentrale Adapterproteine dephosphoryliert. Durch die Abschwächung der Signalübertragung über den Insulin- und den Leptinrezeptor sowie durch die Modulation der Outputs der JAK/STAT-, MAPK/ERK- und PI3K/AKT-Signalwege trägt PTP1B zur Regulation des zellulären Stoffwechsels, der Wachstumsfaktor-Antwort und inflammatorischer Signalgebung bei. Eine veränderte PTPN1/PTP1B-Aktivität wird mit einer gestörten Glukosehomöostase und erhöhter Adipositas in Verbindung gebracht und wird häufig im Kontext onkogener Signalnetzwerke untersucht, die durch aberrante Tyrosinphosphorylierung getrieben sind. In Immun- und Stromakompartimenten prägt PTP1B zudem die Dynamik der Zytokinsignalgebung, was es für Studien zu zellulären Stressantworten und Signalweg-Crosstalk relevant macht.
PTP1B Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des PTPN1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von PTPN1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die PTPN1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit PTPN1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.