PSMD1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-405171-LAC

PSMD1 kodiert eine zentrale, nicht ATPase-aktive Untereinheit des 19S-Regulatorpartikels des 26S-Proteasoms und unterstützt die ubiquitinabhängige Erkennung, die mit Deubiquitinierung gekoppelte Prozessierung sowie die Weiterleitung von Substraten an den katalytischen 20S-Kern. Über seine Rolle im Ubiquitin-Proteasom-System beeinflusst PSMD1 die Proteinhomöostase, die Zellzyklusprogression, DNA-Schadensantworten, die Antigenprozessierung und die Regulation von Transkriptionsfaktoren wie NF-κB. Störungen von regulatorischen Proteasom-Untereinheiten können Proteostase-Netzwerke und Stresssignalwege verschieben und dadurch Signalwege beeinflussen, die mit Apoptose, Entzündung und metabolischer Anpassung verknüpft sind. Veränderte Proteasomfunktion und Expressionsmuster werden häufig in Zusammenhängen der Krebsbiologie, Neurodegeneration und Immundysregulation untersucht, in denen proteotoxischer Stress und Proteinumsatz zentrale experimentelle Variablen sind.

PSMD1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente PSMD1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

PSMD1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der PSMD1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen PSMD1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen PSMD1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.