Plasmide CRISPR/Cas9 KO PSK2 (m): sc-432149
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- PSK2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique PSK2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PSK2 Antibody (22): sc-136094
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PSK2 (m) | sc-432149 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin *Taok1* code la kinase sérine/thréonine PSK2, une MAP3K de la famille STE20 qui couple des signaux issus du cytosquelette à des voies de signalisation sensibles au stress. PSK2 participe à la régulation des cascades MAPK, notamment des voies JNK et p38, et contribue au développement neuronal, à la croissance axonale et à l’organisation synaptique via ses effets sur la dynamique des microtubules et de l’actine. L’activité de *Taok1* influence également le cycle cellulaire et des programmes liés à l’apoptose, reliant la signalisation par kinases à l’homéostasie cellulaire. La dérégulation des réseaux associés à TAOK1 a été impliquée dans des phénotypes neurodéveloppementaux et dans d’autres contextes où une signalisation MAPK altérée et un remodelage du cytosquelette constituent des mécanismes pathogènes.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PSK2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Taok1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Taok1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Taok1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PSK2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Taok1 pour l'étude de la signalisation de PSK2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Taok1 essentiels à la fonction de PSK2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Taok1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le PSK2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le PSK2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Taok1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le PSK2 plasmide HDR (m) et le PSK2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Taok1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Taok1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.