Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PRAT4A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404775
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- PRAT4A El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico PRAT4A, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PRAT4A Anticuerpo (F-6): sc-515151
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
PRAT4A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404775 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CNPY3 codifica PRAT4A, una cocaperona residente del retículo endoplásmico que favorece la maduración y el control de calidad de los receptores tipo Toll (TLR) y de otros receptores de la inmunidad innata relacionados. PRAT4A participa en procesos tempranos de la vía secretora que regulan el plegamiento, la glicosilación y el tráfico de los receptores hacia endosomas o la membrana plasmática, influyendo así en la señalización inflamatoria mediada por NF-κB e IRF. Las alteraciones en la función de PRAT4A pueden perturbar la capacidad de respuesta de los receptores de reconocimiento de patrones y los programas de citocinas, vinculando la biología de CNPY3 con estudios sobre infección, inflamación y disrregulación inmunitaria. Su papel en la biogénesis de receptores también la hace relevante para analizar redes de proteostasis del RE y estados de señalización innata específicos de cada tipo celular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO PRAT4A (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CNPY3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CNPY3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CNPY3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PRAT4A.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CNPY3 para la investigación de la señalización de PRAT4A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CNPY3 críticos para la función de PRAT4A
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CNPY3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido PRAT4A CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PRAT4A CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CNPY3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PRAT4A (h) y el plásmido HDR PRAT4A (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CNPY3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CNPY3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.