Plásmido Doble Nickase (h) PPP2R3A: sc-402433-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PPP2R3A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PPP2R3A (h) y el plásmido de doble nickasa PPP2R3A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PPP2R3A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PPP2R3A | sc-402433-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) PPP2R3A | sc-402433-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PPP2R3A codifica PR130, una subunidad reguladora B″ de la fosfatasa de proteínas 2A (PP2A) que ayuda a dirigir el ensamblaje del holoenzima PP2A, su localización subcelular y la selección de sustratos. A través de la desfosforilación mediada por PP2A, PPP2R3A influye en el control dependiente de la fosforilación de la progresión del ciclo celular, la organización del citoesqueleto y las cascadas de transducción de señales que integran entradas impulsadas por quinasas. La regulación alterada de PP2A se ha vinculado ampliamente con la disrupción de señales de crecimiento y de respuesta al estrés, y los cambios en la expresión o función de PPP2R3A se han investigado en el contexto de la reconfiguración de vías oncogénicas y otros mecanismos de enfermedad centrados en la fosforilación. Como resultado, PPP2R3A se estudia con frecuencia para dilucidar cómo la especificidad de PP2A determina las salidas de las vías aguas abajo y los fenotipos celulares.
PPP2R3A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PPP2R3A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PPP2R3A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PPP2R3A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PPP2R3A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.