



주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
Polycystin-1 더블 틈내기효소 플라스미드 (m) | sc-422267-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Polycystin-1 더블 틈내기효소 플라스미드 (m2) | sc-422267-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
마우스 Pkd1은 1차 섬모와 세포–세포 접합부에 국소화되어 기계감지 및 접착 의존성 신호를 통합하는, 크고 막-연관된 수용체 유사 단백질인 polycystin-1을 암호화한다. Polycystin-1은 polycystin-2와 협력하여 세포내 Ca2+ 신호전달과, 상피의 극성, 증식, 그리고 평면 세포 극성에 영향을 미치는 하위 경로들을 조절한다. Pkd1의 기능 장애는 섬모 신호 네트워크와 관형형성(tubulogenesis) 프로그램을 교란하여, 다낭성 신장질환 모델에서 낭종형성(cystogenesis)과 진행성 신장 및 신장 외 표현형에 기여한다. 그 결과 Pkd1은 신장 생물학에서 섬모 의존성 신호전달, 상피 형태형성, 그리고 유전자형–표현형 관계를 연구하는 데 널리 사용된다.
Polycystin-1 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 Pkd1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 Pkd1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 Pkd1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, Pkd1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
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