POL H CRISPR/Cas9 KO质粒 (h2): sc-401794-KO-2

概述

POLH 编码 DNA 聚合酶 η（Pol η），属于 Y 家族跨损伤合成（TLS）聚合酶，可在 DNA 复制过程中对紫外线诱导的环丁烷嘧啶二聚体（CPD）进行准确跨越。它参与 DNA 损伤耐受与复制应激反应，并与增殖细胞核抗原（PCNA）协同工作，通过依赖泛素的“聚合酶切换”，使复制型聚合酶转由专门的 TLS 聚合酶接替。Pol η 的缺失或功能异常会破坏基因组稳定性并提高 UV 诱变水平，因此 POLH 与着色性干皮病变异型（XP‑V）以及由 DNA 修复缺陷驱动的更广泛致癌机制相关。由于 POLH 处在核苷酸切除修复相关的损伤处理与 S 期检查点适应的交汇处，常被用于研究突变特征形成及复制叉动力学相关通路。

POL H CRISPR/Cas9 KO质粒（h2）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中POLH基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对POLH基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏POLH开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使POL H蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建POLH缺失的细胞模型，用于POL H信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 POL H 功能至关重要的 POLH 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 POLH 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 POL H CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 POL H CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 POLH 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 POL H HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 POL H HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由POLH同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定POLH靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。