Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PLC β2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400984
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- PLC β2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico PLC β2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PLC β2 Anticuerpo (B-2): sc-515912
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
PLC β2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400984 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
PLCB2 codifica la fosfolipasa Cβ2 (PLCβ2), un efector asociado a la membrana que actúa aguas abajo de los receptores acoplados a proteína G y que hidroliza PIP2 para generar IP3 y DAG, impulsando la movilización intracelular de Ca2+ y la activación de PKC. Este eje de señalización regula la quimiotaxis, la degranulación, la secreción y la remodelación del citoesqueleto, especialmente en linajes hematopoyéticos, donde PLCβ2 contribuye a la activación de células inmunitarias y a las respuestas inflamatorias. PLCβ2 se integra en las vías GPCR–Gαq/11 y coordina programas transcripcionales dependientes de calcio y el tráfico vesicular. La desregulación de la señalización vinculada a PLCβ2 se ha asociado con una función leucocitaria aberrante y fenotipos proliferativos en modelos de enfermedades hematológicas, lo que respalda su estudio en redes de señalización de la inmunidad y del cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO PLC β2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PLCB2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PLCB2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PLCB2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PLC β2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PLCB2 para la investigación de la señalización de PLC β2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de PLCB2 críticos para la función de PLC β2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PLCB2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido PLC β2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PLC β2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PLCB2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PLC β2 (h) y el plásmido HDR PLC β2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PLCB2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PLCB2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.