Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PIG3 (h): sc-403356
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- PIG3 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique PIG3, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PIG3 Antibody (A-5): sc-166664
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PIG3 (h) | sc-403356 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
TP53I3 code pour PIG3, une oxydoréductase inductible par p53 qui contribue aux réponses cellulaires au stress en modulant l’homéostasie rédox et la dynamique des espèces réactives de l’oxygène (ROS). PIG3 est associé à des voies dépendantes de p53 qui contrôlent la signalisation des dommages à l’ADN, l’apoptose et la régulation des points de contrôle du cycle cellulaire, et a été étudié comme effecteur en aval influençant des phénotypes entraînés par le stress oxydant. Des altérations de l’expression de TP53I3/PIG3 ont été associées à la biologie tumorale et à la sensibilité au stress génotoxique, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques sur l’intégrité du réseau p53 et la signalisation régulée par le rédox dans les cellules humaines.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PIG3 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène TP53I3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du TP53I3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert TP53I3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PIG3.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en TP53I3 pour l'étude de la signalisation de PIG3, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de TP53I3 essentiels à la fonction de PIG3
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de TP53I3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le PIG3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le PIG3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus TP53I3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le PIG3 plasmide HDR (h) et le PIG3 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie TP53I3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles TP53I3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.