PI 3-kinase p110γ CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-401043

Übersicht

PIK3CG kodiert die katalytische p110γ‑Untereinheit der Phosphoinositid‑3‑Kinase (PI3K) der Klasse IB, einen zentralen Vermittler der GPCR‑getriebenen Phosphoinositid‑Signalübertragung in hämatopoetischen und anderen Zelltypen. Die PI3‑Kinase p110γ phosphoryliert Phosphatidylinositol‑Lipide zur Bildung von PIP3 und fördert damit AKT‑abhängige Überlebensprogramme, Zytoskelett‑Umbau sowie gerichtete Chemotaxis über nachgeschaltete Effektoren wie PDK1, mTOR und Regulatoren kleiner GTPasen. Dieser Signalweg integriert Signale von Chemokinrezeptoren, Komplementrezeptoren und entzündlichen Mediatoren, um Leukozytenaktivierung, Migration und den oxidativen Burst zu steuern. Eine fehlregulierte PIK3CG‑Signalgebung wurde mit abweichenden Entzündungsreaktionen und Immunzell‑Dysfunktion in Verbindung gebracht und wird außerdem im Kontext von Tumor‑Immun‑Interaktionen und der Signalgebung in der Mikroumgebung untersucht.

Das PI 3-kinase p110γ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des PIK3CG-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des PIK3CG-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von PIK3CG nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PI 3-kinase p110γ-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von PIK3CG-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PI 3-kinase p110γ-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf PIK3CG-Exone abzielen, die für die PI 3-kinase p110γ-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere PIK3CG-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PI 3-kinase p110γ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom PI 3-kinase p110γ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des PIK3CG-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PI 3-kinase p110γ HDR-Plasmid (h) und PI 3-kinase p110γ HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von PIK3CG-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten PIK3CG-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.