Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (m) PI 3-kinase p110β: sc-428980-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) PI 3-kinase p110β correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PI 3-kinase p110β Double Nickase (m) et le plasmide PI 3-kinase p110β Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Pik3cb. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PI 3-kinase p110β Antibody (C-8): sc-376641
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) PI 3-kinase p110β | sc-428980-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) PI 3-kinase p110β | sc-428980-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Pik3cb code la sous-unité catalytique p110β de la phosphoinositide 3‑kinase (PI3K) de classe IA, une kinase lipidique qui phosphoryle le PIP2 pour produire du PIP3 et propager la signalisation PI3K–AKT. Dans les cellules de souris, p110β contribue à la signalisation liée aux récepteurs des facteurs de croissance et aux RCPG (récepteurs couplés aux protéines G), en coordonnant des processus en aval tels que la survie cellulaire, la prolifération, le métabolisme, le trafic vésiculaire et la dynamique du cytosquelette. Elle fonctionne de concert avec les sous-unités régulatrices p85 pour contrôler l’amplitude de la voie et la signalisation spatio‑temporelle. Le dérèglement des composants de la voie PI3K, notamment une activité altérée de p110β, est largement étudié dans des contextes de croissance cellulaire aberrante, de phénotypes métaboliques et de défauts de signalisation liés à l’immunité.
PI 3-kinase p110β Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Pik3cb dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Pik3cb. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Pik3cb. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Pik3cb.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.