PHF24 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-409845

Übersicht

PHF24 (PHD-Finger-Protein 24) ist ein nukleäres Protein, das einen PHD-Typ-Zinkfinger enthält – ein Motiv, das häufig an der Erkennung von Histonmodifikationen und der Koordination einer chromatinabhängigen Regulation der Transkription beteiligt ist. Indem PHF24 den epigenetischen Zustand mit Genexpressionsprogrammen verknüpft, kann es die neuronale Differenzierung, synaptische Signalübertragung und aktivitätsabhängige transkriptionelle Antworten beeinflussen, die die zelluläre Identität prägen. Eine veränderte Regulation von Chromatin-„Readern“ und Netzwerken der Transkriptionskontrolle wird mit neuroentwicklungsbedingten und neuropsychiatrischen Phänotypen in Verbindung gebracht, was PHF24 für mechanistische Studien hirnbezogener Signalwege relevant macht. Die Aufklärung der PHF24-Funktion kann helfen zu verstehen, wie die Interpretation epigenetischer Signale mit transkriptionellen Schaltkreisen und nachgeschalteten zellulären Phänotypen zusammenwirkt.

Das PHF24 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des PHF24-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des PHF24-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von PHF24 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PHF24-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von PHF24-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PHF24-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf PHF24-Exone abzielen, die für die PHF24-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere PHF24-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PHF24 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom PHF24 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des PHF24-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PHF24 HDR-Plasmid (h) und PHF24 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von PHF24-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten PHF24-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.