PHF14 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411313

Descripción general

PHF14 (proteína 14 con dedo PHD) codifica un regulador asociado a la cromatina implicado en el control transcripcional mediante el reconocimiento de modificaciones de histonas y la coordinación de estados epigenéticos. Se ha relacionado con la regulación de programas de diferenciación celular, la progresión del ciclo celular y redes de expresión génica que modelan la organización del citoesqueleto y la señalización del desarrollo. Al modular la accesibilidad de la cromatina, PHF14 influye en vías implicadas en la especificación de linajes y la homeostasis tisular, con relevancia para la regulación transcripcional aberrante observada en el cáncer y en trastornos del desarrollo. La investigación sobre PHF14 respalda su uso como un nodo para diseccionar fenotipos impulsados por la cromatina, como la proliferación y migración alteradas, y la expresión génica dependiente del contexto.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PHF14 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PHF14 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PHF14 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PHF14 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PHF14.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PHF14 para la investigación de la señalización de PHF14, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PHF14 críticos para la función de PHF14
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PHF14 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PHF14 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PHF14 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PHF14. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PHF14 (h) y el plásmido HDR PHF14 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PHF14 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PHF14 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.