Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
PGRP-S Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423451
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PGRP-S Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico PGRP-S, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: PGRP-S Antibody (G-1): sc-365304
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PGRP-S Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-423451 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Pglyrp1 codifica la proteina di riconoscimento del peptidoglicano S (PGRP-S), una molecola secretoria di riconoscimento dei pattern che si lega al peptidoglicano batterico e contribuisce alla sorveglianza immunitaria innata. Nei topi, PGRP-S aiuta a modulare le risposte antimicrobiche e la segnalazione infiammatoria a livello mucosale e sistemico, influenzando l’attivazione dei leucociti e le vie di sensing microbico. Un’alterata attività della famiglia PGRP è stata collegata a interazioni ospite–microbo disregolate, a una maggiore suscettibilità alle infezioni e a fenotipi infiammatori rilevanti per i tessuti di barriera. Pglyrp1 viene quindi studiato nel contesto dell’omeostasi dell’immunità innata, dell’immunità dipendente dal microbioma e di modelli di malattia associati all’infiammazione.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO PGRP-S (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Pglyrp1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Pglyrp1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Pglyrp1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina PGRP-S.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Pglyrp1 per lo studio della segnalazione di PGRP-S, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Pglyrp1 critici per la funzione di PGRP-S
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Pglyrp1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal PGRP-S CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal PGRP-S CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Pglyrp1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal PGRP-S Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR PGRP-S (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Pglyrp1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Pglyrp1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.