Partículas Lentivirales de Activación (m) PGAM5: sc-428371-LAC
- Especies Diana: mouse
- 200 µl de Partículas Lentivirales de Activación CRISPR/dCas listas para usar
- Partículas Lentivirales de Acitvación (m) PGAM5 es un sistema de activación de la trascripción por mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen determinado a través de la tranducción lentiviral de las células
- Partículas Lentivirales de Acitvación (m) PGAM5 incluyen los siguientes elementos activadores SAM: plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada, (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y un plásmido que codifica la secuencia de diana específica de 20 nt de ARN. También contienen genes de resistencia a blasticidina, higromicina y puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación génica
- Los gRNA codificados por el PGAM5 Plásmido de activación lentiviral (m) y el PGAM5 Plásmido de activación lentiviral (m2) se dirigen a regiones reguladoras distintas del promotor Pgam5. Puede que haya uno o ambos diseños disponibles
- Tras la transfección, la eficacia de la activación génica puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PGAM5 Anticuerpo (A-3): sc-515880
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Partículas Lentivirales de Activación (m) PGAM5 | sc-428371-LAC | 200 µl | $455.00 |
El gen Pgam5 de ratón codifica PGAM5, una fosfatasa de serina/treonina anclada a la mitocondria que integra el control de calidad mitocondrial con la señalización de estrés. PGAM5 modula la mitofagia y la dinámica mitocondrial mediante interacciones con PINK1/Parkin y con la maquinaria de fisión, y puede influir en vías de muerte celular programada vinculadas al estrés oxidativo. Al regular nodos de señalización dependientes de fosforilación, PGAM5 conecta la disfunción mitocondrial con procesos relevantes para la inflamación y la neurodegeneración, lo que la convierte en una diana útil para desentrañar mecanismos de adaptación al estrés en células de mamífero. La actividad alterada de PGAM5 se ha asociado con un desequilibrio en la balanza apoptosis/necrosis y con alteraciones en la homeostasis energética, lo que respalda su relevancia en modelos de biología de enfermedades metabólicas e inflamatorias.
Las partículas de activación lentiviral PGAM5 (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Pgam5 en una gama más amplia de tipos de células humanas.
Las partículas de activación lentiviral PGAM5 (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Pgam5, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de PGAM5. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Pgam5 y la arquitectura reguladora.
El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.