Plásmido Doble Nickase (h) PCGF5: sc-416432-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PCGF5 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PCGF5 (h) y el plásmido de doble nickasa PCGF5 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PCGF5. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PCGF5 | sc-416432-NIC | 20 µg | $410.00 |
PCGF5 (polycomb group ring finger 5) codifica una proteína con dominio RING finger que se asocia con complejos del grupo Polycomb y contribuye a la represión génica dependiente de la cromatina. Mediante la regulación de modificaciones de histonas y de la arquitectura de la cromatina de orden superior, PCGF5 ayuda a controlar programas de transcripción implicados en la identidad celular, la diferenciación y el patrón del desarrollo. PCGF5 se ha vinculado a vías de silenciamiento mediadas por Polycomb que se intersectan con el control del ciclo celular y la especificación de linaje, procesos que con frecuencia se ven alterados en contextos de cáncer y enfermedades del neurodesarrollo. Sus interacciones moleculares dentro de ensamblajes relacionados con PRC1 lo convierten en un objetivo útil para desentrañar la regulación epigenética de redes génicas en células humanas.
PCGF5 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PCGF5 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PCGF5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PCGF5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PCGF5 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.