Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) PARP1: sc-419018-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)PARP1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PARP1 (m) y el plásmido de doble nickasa PARP1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Parp1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PARP1 Anticuerpo (B-10): sc-74470
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) PARP1 | sc-419018-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) PARP1 | sc-419018-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen murino *Parp1* codifica la poli(ADP-ribosa) polimerasa 1 (PARP1), un sensor del daño en el ADN asociado a la cromatina que cataliza la PARilación de sí misma y de otras proteínas nucleares en respuesta a roturas de cadena simple y doble. PARP1 coordina la reparación por escisión de bases y la reparación de roturas de cadena simple, e influye en la estabilidad de la horquilla de replicación mediante el reclutamiento de factores de reparación del ADN y la remodelación de la estructura de la cromatina. Más allá del mantenimiento del genoma, PARP1 modula programas transcripcionales y la señalización inflamatoria, incluida la interacción con NF-κB y vías de respuesta al estrés. La actividad desregulada de PARP1 o la alteración de la expresión de *Parp1* se asocia con inestabilidad genómica y se estudia con frecuencia en contextos como la biología del cáncer, la neurodegeneración y el daño tisular relacionado con isquemia en modelos murinos.
PARP1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Parp1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Parp1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Parp1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Parp1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.