PARM-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406775

Descripción general

PARM1 codifica la proteína 1 similar a mucina regulada por andrógenos en próstata (PARM-1), una proteína asociada al retículo endoplásmico, de tipo mucina, implicada en la regulación de la adaptación al estrés celular y la homeostasis de la vía secretora. Las actividades descritas vinculan a PARM-1 con la señalización de la respuesta a proteínas mal plegadas y con procesos de control de calidad del RE que influyen en la supervivencia celular, la sensibilidad a la apoptosis y los programas de diferenciación. La expresión de PARM1 responde a señales hormonales y al contexto tisular, y se ha estudiado en biología epitelial y en perfiles transcripcionales asociados a tumores. Estas características hacen de PARM1 un punto de partida útil para investigar cómo las vías vinculadas al RE moldean la proteostasis, el control del crecimiento y fenotipos relevantes para enfermedades en sistemas modelo humanos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PARM-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PARM1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PARM1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PARM1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PARM-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PARM1 para la investigación de la señalización de PARM-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PARM1 críticos para la función de PARM-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PARM1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PARM-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PARM-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PARM1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PARM-1 (h) y el plásmido HDR PARM-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PARM1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PARM1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.