Paraplegin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406299

개요

SPG7는 미토콘드리아 내막의 m-AAA 프로테아제 복합체에 속하는 ATP 의존성 금속단백분해효소인 파라플레긴(paraplegin)을 암호화하며, 단백질 품질 관리, 단백질분해적 가공, 그리고 잘못 접힌 막 단백질 및 기질(matrix) 연관 기질의 제거(턴오버)를 지원합니다. 파라플레긴은 내막 단백질 조성에 대한 조율된 감시를 통해 미토콘드리아 단백질 항상성(proteostasis), 호흡사슬 유지, 그리고 산화 스트레스 및 단백질 독성 스트레스에 대한 항상성 반응에 기여합니다. SPG7의 기능이 교란되면 미토콘드리아 기능이 손상되며, 유전성 경직성 하지마비를 포함한 신경퇴행성 표현형과 연관되어 축삭의 취약성과 에너지 의존적 신경세포 유지 기전을 연구하는 데 유용한 표적이 됩니다. 또한 SPG7 중심 모델은 미토콘드리아 역동성, 미접힘 단백질 반응(UPR), 스트레스 적응 신호전달에 관여하는 경로를 이해하는 데도 도움을 줍니다.

Paraplegin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SPG7 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SPG7 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SPG7의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Paraplegin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Paraplegin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SPG7 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Paraplegin 기능에 중요한 SPG7 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SPG7 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Paraplegin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Paraplegin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SPG7 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Paraplegin HDR 플라스미드 (h) 및 Paraplegin HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SPG7 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SPG7 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.