Plasmide Double Nickase (h) PAOX: sc-406710-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PAOX correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PAOX Double Nickase (h) et le plasmide PAOX Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PAOX. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PAOX | sc-406710-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PAOX | sc-406710-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La PAOX (polyamine oxydase) humaine est une enzyme flavino‑dépendante qui catalyse l’oxydation de la N1‑acétylspermine et de la N1‑acétylspermidine, contribuant à la rétroconversion des polyamines et au maintien de l’homéostasie cellulaire des polyamines. En produisant de la spermidine/de la putrescine et des sous‑produits réactifs tels que le peroxyde d’hydrogène, l’activité de la PAOX relie le métabolisme des polyamines à l’équilibre rédox et à la signalisation du stress oxydatif. Cette voie s’articule avec des processus tels que la prolifération cellulaire, la différenciation et les réponses au stress via la modulation des réserves intracellulaires de polyamines. La dérégulation du catabolisme des polyamines et le stress oxydatif associé ont été étudiés dans des contextes comme la biologie du cancer, la neurodégénérescence et les lésions tissulaires inflammatoires, ce qui fait de la PAOX une cible utile pour des investigations mécanistiques.
PAOX Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PAOX dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PAOX. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PAOX. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PAOX.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.