PAM CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422110

개요

펩티딜글리신 알파-아미드화 모노옥시게나아제(PAM)는 마우스 Pam 유전자에 의해 암호화되는 이중기능 효소로, 많은 신경펩타이드와 펩타이드 호르몬의 C-말단 아미드화를 촉매합니다. 이 변형은 완전한 생물학적 활성을 위해 필수적입니다. 구리와 아스코르빈산(비타민 C)에 의존하는 이 경로는 분비 경로 내에서 펩타이드 성숙을 지원하며, 신경내분비 및 신경세포에서 조절 분비에도 영향을 미칩니다. Pam 활성은 소포 생합성과 분비 과립 기능을 시냅스 전달, 스트레스 반응, 대사, 심혈관 항상성을 조절하는 신경펩타이드 신호 네트워크와 연결합니다. 펩타이드 아미드화의 이상 조절과 PAM 기능 변화는 신경발달 및 신경정신과적 표현형, 내분비 불균형, 심장대사적 형질과 연관되어 왔으며, Pam은 분비 경로 생물학의 기전을 연구하기에 유용한 유전자 좌위입니다.

PAM CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Pam 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Pam 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Pam의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PAM 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PAM 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Pam 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PAM 기능에 중요한 Pam 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Pam 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PAM CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 PAM CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Pam 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PAM HDR 플라스미드 (m) 및 PAM HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Pam 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Pam 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.