PALM2-AKAP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407117

Descripción general

PALM2-AKAP2 es un gen de fusión humano que da lugar a una proteína quimérica que combina características de paralemmin-2 (PALM2), una fosfoproteína asociada a la membrana implicada en la remodelación de actina y el crecimiento de neuritas, con la proteína de anclaje de la quinasa A 2 (AKAP2), un andamiaje que organiza espacialmente la señalización de la proteína quinasa A (PKA) dependiente de AMPc. Al anclar actividades de quinasas y fosfatasas a microdominios subcelulares definidos, PALM2-AKAP2 está en posición de influir en la señalización compartimentalizada de AMPc/PKA, la dinámica del citoesqueleto y el tráfico de membranas. La expresión alterada o los reordenamientos que involucran este locus se han explorado en el contexto de señalización desregulada y cambios en la arquitectura celular relevantes para la biología del cáncer y los procesos de neurodesarrollo. Como nodo de señalización ligado a un andamiaje, resulta útil para estudiar cómo la señalización local de quinasas se integra con programas de adhesión, motilidad y morfología.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PALM2-AKAP2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PALM2-AKAP2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PALM2-AKAP2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PALM2-AKAP2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PALM2-AKAP2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PALM2-AKAP2 para la investigación de la señalización de PALM2-AKAP2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PALM2-AKAP2 críticos para la función de PALM2-AKAP2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PALM2-AKAP2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PALM2-AKAP2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PALM2-AKAP2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PALM2-AKAP2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PALM2-AKAP2 (h) y el plásmido HDR PALM2-AKAP2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PALM2-AKAP2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PALM2-AKAP2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.