ORP150 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419398

개요

Hyou1은 ORP150(저산소 유도 단백질 1로도 알려짐)을 암호화하며, ORP150은 소포체(ER)에 상주하는 HSP70 계열 샤페론으로서 저산소, 포도당 결핍 및 기타 세포 스트레스 상황에서 단백질 접힘과 품질 관리를 지원합니다. ORP150은 ER 단백질 항상성(proteostasis) 네트워크 내에서 기능하며, PERK–eIF2α, IRE1–XBP1, ATF6와 같은 접힘 단백질 반응(UPR) 경로와 협력해 오접힌 단백질의 축적을 제한하고 분비 경로의 무결성을 유지합니다. 마우스 모델 및 세포 시스템에서 ORP150 활성의 변화는 세포 생존, 염증, 대사 항상성에 영향을 미치는 스트레스 적응 기전과 연관되어 왔습니다. ER 스트레스 처리와 프로테오스타시스의 조절 이상은 저산소와 단백질 독성 스트레스가 두드러지는 허혈성 손상, 신경퇴행, 종양 미세환경 생물학 연구에서 중요한 주제입니다.

ORP150 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Hyou1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Hyou1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Hyou1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ORP150 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ORP150 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Hyou1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ORP150 기능에 중요한 Hyou1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Hyou1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ORP150 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 ORP150 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Hyou1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ORP150 HDR 플라스미드 (m) 및 ORP150 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Hyou1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Hyou1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.