Plásmido Doble Nickase (h) Op18: sc-401656-NIC

STMN1 codifica la estatmina/oncoproteína 18 (Op18), una fosfoproteína citosólica que se une a heterodímeros de tubulina y promueve la catástrofe de los microtúbulos, modulando así el ensamblaje del huso, la progresión mitótica y el tráfico intracelular. Su actividad está regulada por fosforilación aguas abajo de nodos de señalización como MAPK y PI3K/AKT, acoplando señales de factores de crecimiento a la dinámica del citoesqueleto y al control del ciclo celular. La expresión desregulada de STMN1 se asocia con frecuencia a fenotipos proliferativos e invasivos en biología del cáncer y también se ha vinculado a una estabilidad alterada de los microtúbulos neuronales en modelos de neurodegeneración. En consecuencia, STMN1 se estudia ampliamente en vías que gobiernan la mitosis, la migración y las respuestas al estrés que remodelan la red de microtúbulos.

Op18 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus STMN1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de STMN1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de STMN1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con STMN1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.