Olfr303 Lentiviral Activation Particles (m): sc-434741-LAC

Olfr303 kodiert in der Maus einen olfaktorischen Rezeptor, der zur Klasse‑A‑Familie der rhodopsinähnlichen GPCRs gehört und voraussichtlich die Bindung von Duftstoffen an die Signalübertragung über heterotrimere G‑Proteine koppelt. Nach Aktivierung stoßen olfaktorische Rezeptoren typischerweise cAMP‑vermittelte Transduktionskaskaden an, die zyklisch‑nukleotid‑gesteuerte Ionenkanäle sowie nachgeschaltete, calciumabhängige neuronale Antworten regulieren und so die sensorische Kodierung und Verhaltensausgänge prägen. Obwohl Olfr303 vor allem im Kontext des Geruchssinns untersucht wird, wurde eine ektope Expression olfaktorischer Rezeptoren in nicht‑olfaktorischen Geweben mit weiter gefassten, durch GPCRs regulierten Prozessen in Verbindung gebracht, darunter die Modulation zellulärer Signalzustände und chemotaxisähnliche Reaktionen. Diese Eigenschaften machen Olfr303 relevant für die Untersuchung der Logik von GPCR‑Signalwegen, der Biologie sensorischer Neuronen und von Deorphanisierungs‑Workflows für Rezeptoren.

Olfr303 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Olfr303-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Olfr303 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Olfr303-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Olfr303-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Olfr303-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.