OKL38 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405178

Descripción general

OSGIN1 codifica OKL38, una proteína inducida por el estrés oxidativo implicada en la inhibición del crecimiento y la adaptación celular al estrés. OKL38 se asocia con la homeostasis redox y con respuestas al estrés vinculadas a p53, y se le han atribuido funciones en la regulación de la progresión del ciclo celular, la apoptosis y la función mitocondrial en condiciones de daño. Se han observado alteraciones en la expresión de OSGIN1/OKL38 en contextos de transformación epitelial y biología tumoral, donde la desregulación de las señales de estrés y de las vías mitocondriales contribuye a los mecanismos de enfermedad. Como nodo sensible al estrés, OSGIN1 ofrece un punto de apoyo útil para analizar cómo las señales oxidativas moldean los programas transcripcionales y las decisiones de destino celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO OKL38 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen OSGIN1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del OSGIN1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de OSGIN1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína OKL38.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en OSGIN1 para la investigación de la señalización de OKL38, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de OSGIN1 críticos para la función de OKL38
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de OSGIN1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido OKL38 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido OKL38 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus OSGIN1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR OKL38 (h) y el plásmido HDR OKL38 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología OSGIN1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana OSGIN1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.