OB-cadherin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401051
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- OB-cadherin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico OB-cadherin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: OB-cadherin Anticuerpo (F-3): sc-365867
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
OB-cadherin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401051 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CDH11 codifica la OB-cadherina, una cadherina clásica que media la adhesión homofílica célula–célula dependiente de calcio y contribuye a la arquitectura tisular y a la señalización intercelular. A través de sus interacciones con las cateninas, la OB-cadherina conecta las uniones adherentes con el citoesqueleto de actina e influye en vías que regulan la polaridad celular, la migración y la mecanotransducción, incluida la regulación de la disponibilidad de β-catenina y la remodelación de las uniones. CDH11 se expresa de forma destacada en linajes mesenquimales y compartimentos estromales, donde favorece la organización de la matriz extracelular y programas de motilidad celular. La expresión desregulada de CDH11 se ha asociado con el remodelado fibrótico, la patología articular inflamatoria y las interacciones tumor–estroma relevantes para la invasión y la formación del nicho metastásico.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO OB-cadherin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CDH11 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CDH11 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CDH11 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína OB-cadherin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CDH11 para la investigación de la señalización de OB-cadherin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CDH11 críticos para la función de OB-cadherin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CDH11 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido OB-cadherin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido OB-cadherin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CDH11. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR OB-cadherin (h) y el plásmido HDR OB-cadherin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CDH11 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CDH11 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.